Метод флотации мокроты

Содержание
  1. Сбор мокроты на микобактерии туберкулеза: правила, алгоритм, анализ, исследование, техника сбора
  2. Как собрать мокроту для анализа
  3. Методы исследований
  4. Бактериоскопия
  5. Люминесцентный
  6. ПЦР
  7. Бактериологический
  8. Расшифровка
  9. Дальнейшие действия
  10. Исследование мокроты: цели и методы исследования
  11. Что выявляет анализ
  12. При каких состояниях показан анализ
  13. Подготовка к исследованию
  14. Основные правила сбора
  15. Количество мокроты при разных заболеваниях
  16. С чем связано уменьшение или увеличение выделения секрета
  17. Характер выделений
  18. Цвет мокроты
  19. Запах
  20. Наличие слоев
  21. Примеси
  22. Химический метод
  23. Цитологический метод исследования секрета
  24. Материал, полученный при игловой биопсии
  25. Применение бактериоскопии
  26. Бактериоскопия пациентов с неспецифическими заболеваниями легких
  27. Объем секрета у здорового человека
  28. Анализ мокроты на туберкулез легких: правила сбора, что это такое и как сдавать?
  29. Показания и противопоказания к проведению анализа
  30. Подготовка, проведение и расшифровка
  31. Плюсы и минусы анализа
  32. Анализы на туберкулез
  33. Бактериоскопический метод
  34. Метод флотации
  35. Люминесцентная микроскопия
  36. Фазово-контрастная микроскопия
  37. Исследование смыва из бронхов
  38. Исследование мочи, кала, цереброспинальной и плевральной жидкости на МБТ
  39. Предварительная обработка биологического материала
  40. Биологический метод
  41. Ускоренные методы поиска микобактерий
  42. Молекулярно-генетические методы

Сбор мокроты на микобактерии туберкулеза: правила, алгоритм, анализ, исследование, техника сбора

Метод флотации мокроты

Если у человека есть подозрение на туберкулез, необходимо как можно раньше выявить данное заболевание или исключить его наличие.

Чтобы определить уровень скопления патогенов, их чувствительность к лекарственным средствам, необходимо сдать специальный анализ.

Назначается сбор мокроты на микобактерии туберкулеза, который проводится по строгим правилам, чтобы минимизировать погрешности.

Как собрать мокроту для анализа

Туберкулез часто маскируется под иные болезни, поэтому диагностировать его бывает трудно. Часто течение болезни воспринимается как простое ОРВИ.

Чтобы диагностировать болезнь, нужно пройти рентген грудной клетки, который покажет наличие патологического процесса в легких, сдать анализ мокроты на микобактерии туберкулеза. Такое исследование является обязательным и при сдаче нужно соблюдать правила сбора мокроты на туберкулез.

Анализ на микобактерии туберкулеза проводится следующим образом:

  • обязательно на голодный желудок, лучше всего рано утром;
  • нельзя чистить зубы перед взятием мокроты;
  • перед анализом необходимо прополоскать рот теплой кипяченой водой;
  • взятия происходит после нескольких глубоких вдохов, которые провоцируют отхаркивание.

Мокрота собирается в заранее подготовленный стерильный контейнер, который можно приобрести в аптеке. Для достоверного анализа необходимо наполнить контейнер не менее 5 мл материала, после чего в срочном порядке нужно сдать анализ в ближайшую лабораторию.

При сдаче анализа не стоит касаться края контейнера ртом и руками, чтобы не нарушить стерильность.

Анализ мокроты у больных туберкулезом не особо отличается от выше описанной схемы. Но все-таки есть несколько нюансов, которые и надо соблюдать для того, чтобы результат исследования был как можно точнее.

Алгоритм достаточно прост:

  1. Необходимо проводить такой анализ в отдельной комнате с хорошей вентиляцией, чтобы при попадании бактерий в пространство не произошло заражение других людей.
  2. При сборе биоматериала окна в помещении должны быть открыты, а количество материала должно быть не меньше 3 мл.
  3. Собирать биоматериал можно в домашних условиях или на улице, главное соблюдать выше написанные рекомендации, чтобы не подвергать других людей опасности.

Стоит обратить внимание на контейнер для биоматериала. Обязательно данный сосуд должен обладать широким горлышком, быть прозрачным и прочным, чтобы на нем можно было написать информацию о пациенте.

Стерильность – это главное условие, данные сосуды не должны подвергаться повторному использованию. Результаты исследования приходят спустя 3 суток с момента сдачи.

Методы исследований

Существует несколько методов, направленных на исследование мокроты:

  • бак-посев;
  • микроскопическое исследование по Цилю-Нильсену;
  • люминесцентный анализ;
  • методика ПЦР.

Следует рассмотреть все методы, которые позволяют определить наличие палочки Коха в организме человека, приводящей к развитию туберкулеза. Наличие микроорганизма хотя бы в одном анализе указывает на то, что человек является носителем заболевания.

Бактериоскопия

В большинстве случаев используется техника по Цилю-Нильсену. Этот метод относят к маркерному исследованию. После того как необходимое количество биоматериала собрано, в мокроту добавляется специальный раствор, после чего начинается тщательное исследование под микроскопом, который должен быть оснащен иммерсионной системой для таких исследований.

После контактирования со специальным раствором болезнетворные бактерии приобретают красный окрас. Достоинство данного исследования в финансовой доступности и срочности диагностики. Исследование занимает сутки, в срочном порядке может быть осуществлено в течение 60 минут. Но такое исследование не самое надежное.

Люминесцентный

Такой вид исследования проводится при помощи специального микроскопа. Болезнетворные бактерии при исследовании приобретают желтый цвет на общем темном фоне, благодаря чему становятся явными.

При помощи этой методики можно определить, какое количество бактерий скопилось в организме человека.

Исходя из результата, можно диагностировать форму заболевания и степень тяжести протекания туберкулеза.

ПЦР

Данное высокочувствительное исследование несет в себе много информации и заключается в копировании небольшого участка ДНК, что позволяет выявить наличие болезнетворных бактерий в биоматериале человека. Данное исследование хорошо тем, что проводится в течение всего 4 часов, что не дает потерять время в лечении заболевания.

Бактериологический

Бактериологическое исследование проводится при помощи помещения биоматериала в специальную среду. Для того чтобы определить наличие возбудителя в организме, достаточно 2 десятков жизнеспособных КУМ. Данный метод долгий, т.к.

рост бактерий может занимать от 20 дней до 3 месяцев. Результат исследования определяется в виде +, где + говорит о плохом росте, ++ – о среднем, а +++ – об обильном росте бактерий. Самые опасные бактерии имеют маркировку +++.

[attention type=green][attention type=yellow] [/attention][/attention]

Расшифровка

Если выявлены микобактерии туберкулеза, анализ покажет результаты, которые расшифрует лечащий врач. По данным исследования определяется наличие у человека туберкулеза, бронхоэктаза или абсцесса легких, т.к. эти заболевания могут протекать с одинаковыми симптомами.

По составу слизи можно диагностировать астматический приступ или наличие острого бронхита.

При содержании прожилок крови можно диагностировать воспаление легких. При тяжелой форме развития заболевания слизь выходит из организма вместе с кровянистыми выделениями, которые могут быть незаметными или существенными.

Дальнейшие действия

При диагностировании такого заболевания как туберкулез важно прислушиваться к рекомендациям врачей и следовать назначенной терапии. Важно соблюдать МБТ, для того чтобы предотвратить заражение близких людей этой болезнью.

Больной туберкулезом должен длительно лечиться и систематически наблюдаться у врача, т.к. при пренебрежении этими условиями возбудитель будет прогрессировать. Сегодня при выявлении данной болезни на начальной стадии можно полностью вылечиться.

Источник: https://ProTuberkulez.info/diagnostika/sbor-mokroty-na-mikobakterii.html

Исследование мокроты: цели и методы исследования

Метод флотации мокроты

Мокрота является секретом, выделяющимся при воспалении трахеи, бронхов и легких. Ее появление отмечается не только при поражении дыхательных органов, но и при нарушениях сердца и сосудов. Методы исследования мокроты подразумевают макроскопическое, химическое и микроскопическое определение ее характеристик.

Что выявляет анализ

Исследование мокроты дает возможность обнаружить микроорганизмы, вызывающие патологический процесс, обозначить наличие микобактерии при туберкулезе, выявить раковые клетки, кровяные и гнойные примеси, а также определить резистентность бактерий к антибиотикам.

При каких состояниях показан анализ

Исследование мокроты на общий анализ проводится при следующих состояниях:

  • кашель;
  • воспаление легких;
  • воспаление бронхов;
  • нагноение легкого;
  • туберкулез;
  • бронхоэктатическая болезнь;
  • легочная гангрена;
  • опухоль в легких;
  • бронхит в острой форме;
  • бронхит в хронической форме;
  • тонзиллит в хронической форме;
  • туберкулез;
  • коклюш;
  • силикоз;
  • острая форма обструктивного бронхита;
  • воспаление легких;
  • сибирская язва.

Подготовка к исследованию

Слизь будет лучше выделяться, если накануне перед сдачей анализа принять средство для отхаркивания или же употребить большое количество теплого питья. Перед сбором рекомендуется почистить зубы и ротовую полость, прополоскав ее теплой вскипяченной водой.

Основные правила сбора

Сбор мокроты на бактериологическое исследование желательно производить в утренние часы (она скапливается за ночь до приема пищи) в стерильный контейнер, который выдается лабораторией.

Для анализа достаточно количества 5 мл. Анализ секрета производится не позднее, чем через 2 часа после его сбора.

До момента отправки на исследование контейнер с содержимым должен храниться закрытым в холодильнике.

Количество мокроты при разных заболеваниях

Количество выделяемого секрета разнится в зависимости от характера патологического процесса. Обычно оно варьируется от нескольких плевков до 1 л за сутки.

Малое количество выделяется при воспалении бронхов, застойных процессах легких и при начале приступа бронхиальной астмы. В конце приступа объем возрастает.

Он может составлять до 0,5 л, а также выделяться в большом количестве, если имеется отек легких.

[attention type=yellow]

Много слизи выделяется при гнойном процессе в легких при сообщении с бронхами, при нагноении, бронхоэктазе и гангрене.

[/attention]

Исследование мокроты на туберкулез показывает распад тканей легких. В особенности такой процесс провоцирует каверна, которая сообщается с бронхами.

С чем связано уменьшение или увеличение выделения секрета

Увеличение количества выделяемого секрета может быть сопряжено с ухудшением состояния пациента и наблюдаться в период обострения. Увеличение может относиться и к положительной динамике развития болезни.

Уменьшение количества выделяемой слизи может свидетельствовать о регрессе воспаления или же нарушении в области дренирования полости, наполненной гноем. При этом отмечается ухудшение самочувствия больного.

Характер выделений

Слизистый секрет выделяется при бронхитах в острой или хронической форме, бронхиальной астме, пневмонии, онкологической опухоли легкого, бронхоэктатической болезни, эхинококкозе легкого, сопровождающемся нагноением, актиномикозе.

Мокрота с примесью гноя наблюдается при абсцессе легкого, эхинококкозе и бронхоэктатической болезни.

Слизь с примесью крови или же состоящая полностью из крови присуща туберкулезу. Появление крови может свидетельствовать о наличии онкологии, бронхоэктатической болезни, нагноении легкого.

Также такое явление наблюдается при синдроме средней доли, инфаркте в легком, травме, актиномикозе и сифилитическом поражении.

Кровь может выделяться и при крупозном и очаговом воспалении легких, застойных процессах, сердечной астме и отечности легких.

Серозная мокрота отмечается при отечности легких.

Цвет мокроты

Исследование мокроты выявляет ее различную окрашенность. Слизистые и серозные выделения не обладают цветом или же имеют беловатый оттенок.

Присоединение гноя придает секрету зеленоватый оттенок, что характеризует такие патологические процессы, как абсцесс легкого, гангрена, бронхоэктатическая болезнь, актиномикоз легкого.

Выделения с оттенком ржавчины или коричневого цвета указывают на то, что в них содержится не свежая кровь, а продукт ее распада — гематин. Такой секрет может выделяться при крупозном воспалении легких, сибирской язве, инфаркте легкого.

[attention type=red]

Зеленоватый цвет с примесью грязи или же желтый секрет свидетельствует о патологии органов дыхания в сочетании с желтухой.

[/attention]

В ярко-желтый цвет мокрота окрашивается при эозинофильной пневмонии.

Слизь цвета охры встречается при сидерозе легкого.

Черноватый или сероватый секрет отмечается при наличии примеси пыли от угля. При отеке легких серозная мокрота наблюдается в большом количестве. Как правило, она окрашена равномерно в розоватый цвет, что объясняется наличием эритроцитов. Такие выделения похожи на жидкий клюквенный морс.

Окрашиваться секрет может и от некоторых лекарственных препаратов. К примеру, антибиотик “Рифампицин” может придать ему красный цвет.

Запах

О характере патологического процесса в органах дыхания может свидетельствовать и запах секрета. Мокрота отдает запахом гнили при гангрене легкого или гнилостном поражении бронхов, онкологических новообразованиях, осложнившемся некрозе бронхоэктатической болезни.

Наличие слоев

Зачастую исследование выделений выявляет наличие слоев. При застойном характере мокрота с примесью гноя наблюдается при нагноении легкого и бронхоэктатической болезни.

Секрет с примесью гнили содержит в себе три слоя. Верхний слой похож на пену, средний серозный, а нижний с примесью гноя. Такой состав характеризует гангрену легкого.

Примеси

Примесь пищи может отмечаться при наличии злокачественной опухоли в пищеводе при сообщении его с бронхами и трахеей. При попадании эхинококка в бронхи в мокроте могут быть обнаружены крючья или сколекс паразита. Очень редко обнаруживаются взрослые особи аскарид, которые проникают в органы дыхания у ослабленных людей.

Яйца легочной двуустки появляются при разрыве кисты, которая образуется в легких при наличии паразитов.

Гангрена и нагноение легких вызывают появление кусочков некрозов легких. При опухоли в выделениях могут присутствовать их фрагменты.

Свертки, содержащие фибрин, встречаются у пациентов с фибринозным бронхитом, туберкулезом и пневмонией.

Рисовые тельца, или линзы Коха, присущи туберкулезу.

Пробки Дитриха, включающие в себя продукты распада бактерий и ткани легких клеток жирных кислот, встречаются при гнилостном бронхите или же гангрене легкого.

Хроническая форма тонзиллита предполагает выделение из миндалин пробок, схожих с пробками Дитриха.

Химический метод

Исследование мокроты химическим способом предполагает определение:

  • Показателя белка, который может помочь в дифференциальной диагностике хронической формы бронхита и туберкулеза. При бронхите хронической формы в секрете отмечаются следы белка, а при туберкулезном поражении количество белка в мокроте будет намного выше, и оно может быть обозначено цифрами (до 100—120 г/л).
  • Пигментов желчи. Они обнаруживаются в мокроте при поражении органов дыхания в сочетании с гепатитом. В этом случае печень сообщается с легкими. Желчные пигменты присущи пневмонии, что обусловлено распадом внутри легких эритроцитов и последующим изменением гемоглобина.

Цитологический метод исследования секрета

Для дифференциальной диагностики туберкулеза и многих других поражений легких широко применяется цитологический способ, который включает два этапа: клиническое и микроскопическое исследование мокроты.

Клиническое исследование помогает определить, каким методом должен быть собран материал для получения правильного результата анализа.

Существует два основных вида материала, которых требует микроскопическое исследование мокроты: спонтанный и редуцированный. Второй вид секрета получают воздействием разнообразных раздражителей (средства для отхаркивания, ингаляции и т. д.).

Материал, полученный при игловой биопсии

Цитологическое исследование мокроты предполагает изучение макроскопического и микроскопического анализа ее клеток.

Больше всего информации для цитологического анализа несет мокрота, взятая утром на голодный желудок. До исследования она должна храниться не больше 4 часов.

  • В мокроте встречаются клетки плоского эпителия, которые исследуются микроскопически. Но для постановки диагноза они не имеют никакого значения. Клетки цилиндрического эпителия – как единичные, так и в группе – могут отмечаться при таких заболеваниях, как бронхиальная астма, бронхит и рак легких. Следует отметить, что цилиндрический эпителий может появиться и по причине проникновения слизи из носоглотки.
  • Альвеолярные макрофаги представляют собой клетки ретикулоэндотелия. Макрофаги, которые содержатся в протоплазме (фагоцитирующие частицы или пылевые клетки), можно встретить у пациентов, которые длительное время вдыхали пыль.
  • Макрофаги протоплазмы (образуются при распаде гемоглобина) называют клетками сердечного порока. Они могут встречаться во время застойных процессов в легких, стенозе митрального клапана, инфаркте легких.
  • Небольшое количество лейкоцитов содержится в любой мокроте. Их повышенное содержание отмечается в секрете с примесью гноя.
  • Эозинофилы. Такими клетками богата мокрота у астматиков. Клетки могут отмечаться при эозинофильной форме воспаления легких, поражении организма гельминтами, туберкулезе и инфаркте легкого.
  • Эритроциты. Единичные эритроциты не отображают картины заболевания. Появление повышенного количества свидетельствует о наличии кровотечения в легких. В свежей крови определяются неизменные эритроциты. Если же есть примесь крови, которая застоялась в легких в течение долгого времени, то обнаруживаются выщелоченные эритроциты.
  • Раковые клетки. Их можно обнаружить в секрете группами. Они свидетельствуют о наличии опухоли. При нахождении единичных клеток часто возникает трудность при диагностике. В таких случаях проводится повторный анализ мокроты.
  • Эластические волокна, появление которых вызвано распадом легочной ткани, спровоцированным туберкулезом, абсцессом, гангреной, опухолью. Гангрену такие клетки характеризуют не всегда, так как из-за действия ферментов, находящихся в секрете, они могут быть растворены.
  • Спирали Куршмана. Это особые тела, похожие на трубки. Они обнаруживаются при исследовании под микроскопом. Иногда заметны и глазом. Обычно спирали присущи таким заболеваниям, как бронхиальная астма, туберкулез легких и пневмония.
  • Кристаллы Шарко-Лейдена обнаруживаются в мокроте с повышенным содержанием эозинофилов при таких поражениях, как бронхиальная астма, эозинофильная пневмония. Вскрытие очага туберкулеза в просвете бронхов может характеризоваться наличием в секрете эластических волокон-кристаллов ХС, МБТ и аморфной извести (так называемая тетрада Эрлиха) — 100%.

Применение бактериоскопии

Сбор мокроты для исследования бактериоскопическим методом подразумевает анализ секрета на предмет обнаружения в нем микобактерий, характерных для туберкулеза. Они похожи на тонкие, утолщенные по бокам или же посередине кривые палочки разной длины, которые располагаются как поодиночке, так и группами.

Обнаружение микобактерии туберкулеза не является доминантным признаком для диагностики и требует подтверждения бактериологическим способом. Туберкулезные микобактерии при норме в секрете не обнаруживаются.

Основой для анализа служат гнойные частицы, которые берутся из сорока шести различных областей и тщательно растираются до однородной массы двумя стеклами. Далее они сушатся на воздухе и фиксируются пламенем горелки.

Бактериологическое исследование мокроты методом Циля-Нильсена предполагает ее окрашивание в красный цвет. При этом все частицы секрета, за исключением микобактерии, приобретают синий оттенок, а микобактерии приобретают красный цвет.

При подозрении на поражение организма туберкулезом после трехкратного исследования на наличие микобактерий с отрицательным ответом прибегают к применению метода флотации (анализ Поттенджера).

Обычный способ исследования окрашенного мазка на МТБ дает положительный результат только при количестве МТБ не менее 50 000 единиц в 1 мл мокроты. По числу микобактерий судить о наличии туберкулеза нельзя.

Бактериоскопия пациентов с неспецифическими заболеваниями легких

Лабораторные исследования мокроты при наличии неспецифических заболеваний легких при бактериоскопии могут выявить следующие бактерии:

  • При воспалении легких — пневмококки, диплококки Френкеля, бактерии Фридлендера, стрептококки, стафилококки (100%).
  • При гангрене легких можно обнаружить веретенообразную палочку в сочетании со спирохетой Венсана (80%).
  • Дрожжеподобные грибы (70%), для выяснения вида которых требуется посев секрета.
  • Друзы актиномицета (100%) при актиномикозе.

Объем секрета у здорового человека

Объем слизи, выделяемой трахеей и бронхами у человека, не страдающего никакими патологиями, колеблется от 10 до 100 мл/сут.

В норме уровень лейкоцитов невысок, а исследование окрашенного мазка на микобактерии дает отрицательный результат.

Источник: https://FB.ru/article/274276/issledovanie-mokrotyi-tseli-i-metodyi-issledovaniya

Анализ мокроты на туберкулез легких: правила сбора, что это такое и как сдавать?

Метод флотации мокроты

Туберкулез – опасное заболевание, возбудителем которого являются несколько видов микобактерий. Болезнь может поражать различные органы человека: легкие, глаза, нервную систему, однако самым распространенным видом туберкулеза является легочная форма. Возбудитель передается воздушно-капельным путем, через слюну, кровь, иногда – через почву или еду.

Ранняя диагностика туберкулеза имеет социальное значение. Обычно с целью выявления заболевания всему населению до 14 лет ежегодно проводят туберкулиновую пробу – реакцию Манту, позднее – ежегодную флюорографию.

Случаются ситуации, когда проба Манту у ребенка оказалась положительной, или на снимке нашли затемнение – подозрение падает на туберкулез.

В этих случаях необходимо проведение дополнительной диагностики, которая скоординировала бы дальнейшие меры лечения или сняла подозрения на болезнь.

Анализ мокроты для выявления туберкулеза – один из самых точных методов выявления возбудителей болезни. Он требует многократных проб, однако эта мера является гарантией его надежности. Пройти его можно бесплатно по направлению врача в туберкулезном диспансере или в частной клинике.

Показания и противопоказания к проведению анализа

Анализ мокроты на туберкулез позволяет выявить легочную форму заболевания. Обычно показанием для его проведения становится длительный кашель (с мокротой или без), затемнения на рентгенограмме, повышение у пациента температуры. Изучение мокроты входит в комплекс обязательных исследований, которые необходимы для постановки диагноза туберкулеза.

Также в обязательном порядке сбор мокроты на микобактерии туберкулеза проводится в том случае, когда пациент длительное время (дольше 3 месяцев) страдает от сухого или малопродуктивного кашля, который не поддается стандартному лечению средствами от бронхита.

Следует при этом обратить внимание на состав мокроты, если она имеется: при туберкулезе легких она отделяется в небольших количествах, по составу слизисто-гнойная (мутного белого, желтоватого, сероватого цветов), на поздних стадиях имеет кровяные прожилки.

[attention type=green][attention type=yellow] [/attention][/attention]

В связи с тем, что анализ мокроты на БК (возбудителя туберкулеза) может производиться не только при непосредственном отхаркивании, но и при помощи бронхоскопии, он имеет некоторые противопоказания.

Бронхоскопию при туберкулезе могут производить в диагностических целях, если у пациента сухой кашель без отхождения мокроты, и собрать ее в емкость не представляется возможным.

Сбор мокроты методом бронхоскопии предполагает введение трубки в верхние дыхательные пути с использованием местной или общей анестезии. В связи со спецификой процедуры, ее нельзя проводить:

  • людям с аллергией на обезболивающие препараты,
  • пациентам, перенесшим в ближайшие 6 месяцев до обследования инфаркт или инсульт,
  • пациентам с эпилепсией и шизофренией,
  • пациентам с тяжелой дыхательной недостаточностью,
  • пациентам с нарушением свертываемости крови,
  • при стенозе гортани или трахеи.

Детям бронхоскопия проводится с разрешения родителей. В зависимости от возраста ребенка принимается решение об общей или местной анестезии. Показаний для проведения этой процедуры при подозрении на туберкулез больше, чем противопоказаний.

Процедура бронхоскопии безопасна и вызывает осложнения крайне редко (примерно 1 на 5000 случаев), большинство из которых устранимы. Осложнения возможны только при экстренном проведении бронхоскопии (если она проводится не в диагностических, а в реанимационных целях – например, для извлечения инородного предмета).

Подготовка, проведение и расшифровка

Как сдавать мокроту на анализ? Перед проведением исследования врач, как правило, подробно объясняет, как правильно это сделать. Если у пациента подозревают туберкулез легких, мокрота сдается три раза для получения достоверного результата.

Собирать мокроту первый раз необходимо с утра натощак, предварительно обговорив с врачом необходимость принимать отхаркивающее средство.

Желательно перед пробой прополоскать рот водой. Мокрота при кашле (который происходит у больного туберкулезом регулярно) сплевывается в специальную стерильную емкость, которую предварительно выдают пациенту перед диагностикой.

Второй раз необходимо сдать мокроту спустя 4 часа после первой пробы, также натощак. Обычно, чтобы не морить пациента голодом, первую пробу берут ночью, вторую – наутро.

Правила сбора мокроты предусматривают наблюдение медицинского персонала за правильностью сбора анализов, однако возможен и самостоятельный сбор материала пациентом. Третий, последний раз мокроту собирают через сутки.

Собранный материал необходимо передать в лабораторию не позднее, чем спустя 2 часа после помещения в контейнер.

При сборе мокроты путем бронхоскопии пациент должен заранее подготовиться: не есть и не пить в течение как минимум 6 часов. Обычно исследование мокроты при туберкулезе проводят с утра.

[attention type=yellow]

Пациенту в зависимости от его состояния применяют местную или общую анестезию, после чего через горло в трахею ему вводится бронхоскоп, при помощи которого врач либо берет мокроту на исследование, либо удаляет ее избытки из бронхов для обеспечения нормального дыхания.

[/attention]

После исследования пациенту запрещается принимать препараты, разжижающие кровь (аспирин).

Если необходимо провести бактериоскопическое исследование, то делается посев мокроты, а точнее – посев содержащейся в ней бактерий.

Для этого подготавливается препарат – мокрота растирается между стеклышками, окрашивается специальным составом и нагревается. После этого лаборант оценивает посевной материал – смотрит, какие бактерии выросли на стеклышке и по ним составляет заключение о состоянии больного.

Для расшифровки результатов анализа мокроты оценивают ее:

  • количество, цвет,
  • консистенцию,
  • включения (кровяные или иные),
  • бактериологический состав.

Проводить исследования многократно необходимо для того, чтобы исключить вероятность ложноотрицательного результата – такой может возникнуть в том случае, если количество бактерий в конкретном образце недостаточно для определения тестом. Сдавать анализ мокроты для достоверности необходимо минимум три раза, хотя при неоднозначных результатах могут потребоваться дополнительные пробы.

Плюсы и минусы анализа

Анализ мокроты на ВК (или БК) имеет несомненный плюс: он является возможностью выявить заболевание на ранних этапах и подтвердить его практически со стопроцентной точностью. Тест, предусматривая несколько проб, позволяет однозначно определить наличие возбудителей туберкулеза в организме. Он допускает некоторую вариативность проведения, удобную для пациентов в различном состоянии.

Если речь не идет о бронхоскопии, тест довольно прост в осуществлении для пациента и не требует специальной подготовки для его проведения.

Минусом анализа мокроты является длительное ожидание результатов. За счет своей многосторонности, бактериологический тест придется ждать от 3 до 8 недель – это связано с вызреванием посевов бактерий.

Также к минусам можно отнести то, что если есть подозрение на туберкулез, но нет кашля, то пациенту придется проходить не самую простую процедуру бронхоскопии, более того – делать это неоднократно.

[attention type=green][attention type=yellow] [/attention][/attention]

У метода нет побочных эффектов, он не требует сдачи крови или введения какого-либо препарата. По сути, сбор материала (мокроты) проходит для пациента естественным путем без каких-либо сложностей. Этот факт особенно важен для детей, которым тяжело дается сбор крови или иные диагностические процедуры.

Для получения достоверного результата необходимо исследовать полученный материал различными методами – этим и обуславливается длительность лабораторной диагностики. Только лишь бактериологический анализ не исключает возможность заболевания полностью – необходимо также сделать посев мокроты на питательные среды, что занимает довольно длительное время.

Плюсом анализа мокроты является также и то, что анализ качественного состава позволяет выявить различные заболевания верхних дыхательных путей не только бактериологического характера, но и опухолевые и обструктивные процессы (рак легких, бронхиальная астма и т.д.). Таким образом, он позволяет не только подтвердить или исключить туберкулез, но и с высокой точностью установить причину болезни пациента.

Загрузка…

Источник: https://prof-medstail.ru/bolezni-legkih/vyyavlenie-mikobakterij-posredstvom-analiza-mokroty

Анализы на туберкулез

Метод флотации мокроты

Мокроты больного — это смесь секрета желез слизистой оболочки трахеи и бронхов, серозного выпота из патологически измененных сосудов, иногда частиц казеозных масс, некротической грануляционной и легочной ткани, а также примеси солей. Мокроты выделяется при многих заболеваниях легких и бронхов.

В туберкулезных учреждениях больные собирают мокроту в индивидуальные контейнеры, на четверть емкости заполнены раствором хлорамина, где оно частично дезинфицируется. Контейнеры градуированные, и это дает возможность определять суточное количество мокроты.

Макроскопически у больных туберкулезом легких мокрота имеет слизистый или слизисто-гнойный характер, без запаха, гомогенная, не образует слоев. Количество мокроты может быть разной. В начале заболевания туберкулезом легких мокрота не выделяется, затем оно может выделяться утром отдельными плевками, позже его количество может достигать 100-200 мл.

После макроскопического проводят бактериоскопическое, бактериологическое и биологическое исследование мокроты.

Бактериоскопический метод

Бактериоскопический метод охватывает прямую бактериоскопию мазков из патологического материала, окрашенных по Цилю-Нильсену, бактериоскопию методом флотации, люминесцентную микроскопию, фазовоконтрастного микроскопию.

Бактериоскопическое исследование мокроты начинается с приготовления мазка. Для этого мокроты смешивают с раствором натрия гидроксида и центрифугируют для получения осадка. Осадок стеклянными палочками переносят на предметное стекло.

Вторым предметным стеклом его равномерно размещают: накрывают покровным стеклом. Препарат изучают под микроскопом. В нем можно увидит лейкоциты, эластичные волокна, а при специальной окраске — атипичные клетки и различные бактерии.

[attention type=green][attention type=yellow] [/attention][/attention][attention type=red]

Микобактерии окрашиваются по Граму положительно. Для выявления МБТ готовят мазок мокроты высушивают его, фиксируют над пламенем спиртовки, после чего окрашивают по Цилю-Нильсену. Окраска производится сначала карболовым раствором фуксина.

[/attention]

Микобактерии туберкулеза плохо воспринимают окраску, поэтому раствор фуксина наносят на препарат в большом количестве, подогревают над пламенем спиртовки до появления пара. Затем краску сливают, препарат промывают в воде и обесцвечивают в 5% растворе серной кислоты или в смеси этилового спирта с раствором соляной кислоты.

При этом все бактерии и морфологические элементы мокроты, кроме микобактерий туберкулеза, бесцветные. Мазок промывают проточной водой, а затем наносят метиленовый синий на 1-2 мин. После этого раствор краски сливают, мазок промывают и высушивают.

Препарат изучают через иммерсионной систему микроскопа, для чего на препарат наносят каплю иммерсионного масла, чтоб создать одинаковую среду между линзой объектива и препаратом. Микобактерии туберкулеза под микроскопом видно окрашенными в красный цвет.

Метод окраски по Цилю-Нильсену позволяет выявить микобактерии туберкулеза в тех случаях, когда в 1см3 мокроты содержится около 5000 – 10000 МБТ при условии, если просмотрено 300 полей зрения. При небольшом количестве МБТ в мокроте бактериоскопический метод неэффективен.

Исследование мокроты следует проводить в течение трех дней подряд, а при отрицательном результате — применить метод флотации.

Метод флотации

Он основан на том, что при встряхивании двух жидкостей с различным удельным весом легче жидкость всплывает на поверхность одновременно с микобактериями туберкулеза, находящихся в суспензии.

Суть методики заключается в том, что готовят водную суспензию с углеводородами (ксилол, бензол) и МБТ. На поверхность воды утечет сливкообразная пена с МБТ, которую отсасывают пипеткой и наносят на предметное стекло.

Слой пены на предметном стекле высушивают и наносят новый слой пены из колбы. Так наслаивают пену 5-6 раз, после чего мазок фиксируют и окрашивают по Цилю-Нильсену.

Люминесцентная микроскопия

Эффективным методом выявления микобактерий туберкулеза является люминесцентная микроскопия. Суть метода заключается в способности микобактерий туберкулеза, окрашенные специальными красителями (аурамин, родамин), светиться при облучении ультрафиолетовыми лучами.

Преимуществом метода люминесцентной микроскопии является возможность проведения исследований при меньших увеличениях микроскопа, обеспечивает просмотр в короткий срок большего количества полей зрения, чем при обычной микроскопии.

Возможность выявления микобактерий туберкулеза увеличивается на 10-15% по сравнению с обычной бактериоскопии и на 8% – по сравнению с методом флотации.

Используют люминесцентный микроскоп под малым увеличением. На темном фоне видны золотисто-желтые микобактерии туберкулеза.

Фазово-контрастная микроскопия

Это единственный микроскопический метод исследования, позволяющий наблюдать микобактерии и их биологически измененные формы в живом состоянии. Для проведения такого исследования применяют специальное фазовоконтрастное устройство.

При цитологическом исследовании мокроты у больных туберкулезом легких оказывается незначительное количество нейтрофилов в стадии значительной дегенерации на фоне казеозного детрита, скопления мононуклеаров, гигантских клеток Пирогова-Лангханса, иногда эозинофилы.

В случаях, когда мокроты нет или она выделяется в очень малом количестве, больному назначают отхаркивающее микстуру или раздражающие ингаляции. Кроме того, в случаях, когда нет мокроты, исследуют смыв из бронхов.

Исследование смыва из бронхов

Оно проводится врачом. Для этого больному натощак смазывают корень языка, заднюю стенку глотки и надгортанник 1% раствором дикаина. Затем гортанным шприцем вливают в трахею 5-10 мл изотонического раствора натрия хлорида.

У больного сразу возникает сильный кашель и введен изотонический раствор натрия хлорида выкашливается на чашку Петри. Также смыв из бронхов (БАС — бронхоальвеолярный смыв) получают с помощью БАЛ — бронхо-альвеолярного лаважа, который проводят при бронхоскопии. БАЗ исследуют методом флотации или методом посева.

Исследование смыва из бронхов позволяет дополнительно выявлять МБТ в 5-10% случаев.

Исследование мочи, кала, цереброспинальной и плевральной жидкости на МБТ

В клинической практике МБТ нередко приходится проявлять в моче, кале, цереброспинальной и плевральной жидкости. Исследование мочи на МБТ проводят в тех случаях, когда в ходе исследования осадка в каждом поле зрения оказывается не менее 15 лейкоцитов.

Для выявления МБТ мочу многократно центрифугируют, наслаивая каждый раз новые порции с осадка мочи на предметное стекло. Мазок окрашивают по методу Диля-Нильсена. Выявление микобактерий туберкулеза в моче свидетельствует о наличии туберкулеза почек.

Для исследования мочи по методу флотации дают ей постоять, затем 20-30 мл осадка обрабатывают, как обычно, без подогрева на водяной бане. Отсутствие МБТ в гнойной мочи и это не исключает наличия туберкулеза почек. В таких случаях нужно или делать ее посев на питательные среды, или применять биологический метод исследования.

Исследование кала на МБТ следует проводить в случаях подозрения на туберкулез кишок.

При этом надо помнить, что у больных, выделяющих МБТ и частично заглатывают мокроту, МБТ можно выявить при исследовании кала и за непораженных кишок, поскольку микобактерии туберкулеза устойчивы и не всегда погибают под воздействием пищеварительных соков. В кале больных туберкулезом кишок часто оказывается слизь, кровь и примеси гноя.

Обнаружение МБТ в цереброспинальной жидкости нередко имеет решающее значение в диагностике туберкулезного менингита. Однако бактериоскопическим методом выявить МБТ удается только в 10-20% больных туберкулезный менингит. Исследование проводится по следующей методике.

[attention type=green]

Пробирку с цереброспинальной жидкостью ставят на 8-10 часов в прохладном месте. Если в ней образуется нежная фибринная пленка (она состоит из клеток и МБТ), ее наносят на предметное стекло и готовят препарат по методу Циля-Нильсена.

[/attention]

В случаях, когда пленка не образуется, препарат готовят из осадка после центрифугирования.

Для выявления МБТ в плевральном экссудате, пунктатах и выделении из свищей готовят препарат так же, как и при исследовании мокроты.

Бактериологическое исследование состоит из посева материала на питательные среды и дифференциации культуры МБТ от кислотоустойчивых сапрофитов.

Этим методом можно обнаружить микобактерии туберкулеза, когда в 1 мл материала находится 20-100 микробных клеток. Пробирки со средой помещают в термостат при температуре 37 ° С.

Первые колонии микобактерий могут появиться на 18-30-й день, а иногда — через 2-3 месяца. Бактериологическое исследование проводят одновременно с бактериоскопическим трижды.

Посев исследуемого материала производится на специальные среды после предварительной обработки. Чаще всего используют такие среды: Левенштейна-Йенсена, Финна-2, Миддлбрука, Огава и др., которые содержат вещества, задерживающие рост посторонних микроорганизмов.

Предварительная обработка патологического материала заключается в уничтожении сопроводительной бактериальной флоры. Посев материала из бронхов, а также посев мочи делают из центрифугата или осадка. При этом мочу, если она не загрязнена, можно не обрабатывать.

[attention type=green][attention type=yellow] [/attention][/attention]

Предварительная обработка биологического материала

Для подготовки к посеву мокроты, плеврального экссудата, цереброспинальной жидкости существует несколько методов предварительной обработки.

Метод Мазура заключается в обработке патологического материала 3-4 мл 2% раствором серной кислоты в стерильной пробирке. Пробирку встряхивают в течение 3 мин., после чего материал стерильной платиновой петлей наносят на яичные среды.

Метод Петрова: мокроты обрабатывается 4% раствором гидроксида натрия в течение 15 мин., А затем центрифугируется.

Биологический метод

Это привитие патологического материала животным. Гвинейским свинкам или белым мышам в паховой участок или в брюшную полость вводят исследуемый материал в дозе 2-3 мл. Для этого его сначала обрабатывают 3 8% раствором соляной кислоты, хорошо отмывают (иначе на месте введения может возникнуть некроз тканей, возможна даже смерть животного от воздействия кислоты).

Незагрязненную мочу и СМЖ можно прививать без предварительной обработки. При наличии в патологическом материале вирулентных штаммов МБТ ​​животного заболевают туберкулезом и погибают через 1-2 месяца после заражения. Если МБТ масс ослабленную вирулентность, животное погибает позже или может совсем не погибнуть.

В таких случаях животное забивают, и диагноз устанавливают после вскрытия, макро- и микроскопического выявления туберкулезных бугорков. Диагноз можно поставить на основании прижизненного исследования увеличенного регионариого лимфатического узла или инфильтрата, возникший на месте инокуляции патологического материала.

[attention type=green][attention type=yellow] [/attention][/attention]

В последние годы для дифференциации микобактерий используют метод газожидкостной хроматографии, основанный на высокой способности различных соединений (аминокислот, нуклеиновых кислот, жиров, углеводов и т. д.). При этом не исключается этап культивирования возбудителя на питательных средах, что можно отнести к недостаткам метода.

Ускоренные методы поиска микобактерий

К ускоренным методам обнаружения микобактерий принадлежат выявления МБТ с помощью индикаторной пробирки ВВL МОИТ. Рост микобактерий туберкулеза происходит в течение 4-10 суток. Пробирки ВВL МОИТ содержат бульон и флуоресцентное соединение, реагирует на кислород, растворенный в бульоне.

Исходная концентрация кислорода не дает яркого свечения. При поглощении кислорода культурой МБТ наблюдается яркая флуоресценция на дне пробирки. Такой результат считают положительным. Если флуоресценции нет или она незначительна — результат отрицательный.

Показания пробирок учитывают ежедневно, начиная со второго дня инкубации.

В последнее время для диагностики туберкулеза используют иммуноферментные и молекулярно-генетические методы.

Молекулярно-генетические методы

Появились методы идентификации МБТ с помощью моноклональных антител, полученных способом гибридомной технологии. Сейчас существует более 100 моноклональных антител к эпитопам основных антигенов МБТ.

Применение этих антител в иммуноферментном анализе дает возможность очень быстро дифференцировать вид возбудителя, но пока метол используется в научных разработках для идентификации возбудителя туберкулеза, который чаще всего встречается.

Среди молекулярно-генетических методов диагностики туберкулеза чаще всего применяется метод ДНК-зондов и полимеразной цепной реакции (ПЦР).

В основе этих методов лежит принцип комплементарности нуклеотидных оснований в построении двуспиральной молекулы ДНК.

При проведении ДНК-зондирования в случае наличия в пробе исследуемого специфического участка ДНК микобактерий образуется гибрид (двухцепной фрагмент) ДНК исследуемого и ДНК-зонда.

В основе приципа ПЦР лежит многократное увеличение фрагмента ДНК.

Для амплификации (многократного удвоения гена бактерий) требуется наличие двух праймеров (затравок) — небольшого одноцепочечного фрагмента ДНК, что соединяется с комплементарной участком одной из цепей матричной ДНК.

В дальнейшем происходит достройка этой цепи ДНК-полимеразой. Увеличение количества (в 106 раз) фрагмента амплифицируемого оказывается электрофорезом в агаровом геле. Учет результатов реакций осуществляется под пластинами трансиллюминатора в ультрафиолетовом свете,

[attention type=red]

ДНК-зондирование позволяет проводить определение микобактерий в диагностическом материале в течение 2-4 суток, а ПЦР — за 4-6 ч. с максимально высокой чувствительностью методов — 10-100-1000 клеток в пробе исследуемого.

[/attention]

Источник: https://www.eurolab.ua/encyclopedia/323/48749/

Медик
Добавить комментарий

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!: